Excel分析竞争性ELISA数据！

Table of Contents

1. 导言
2. 分析ELISA数据的常用软件
3. 使用Microsoft Excel分析竞争性ELISA数据的示范
4. 数据准备
5. 平均吸光度的计算
6. 标准浓度的录入
7. 数据图表绘制
8. 趋势线的拟合
9. 数据计算与验证
10. 注意事项与总结

🧪分析ELISA数据的常用软件

在这个视频中，我们将展示如何使用Microsoft Excel对竞争性ELISA（酶联免疫吸附测定）数据进行分析。虽然有很多可供选择的ELISA数据分析软件，但Excel是如此常见，因此让我们使用这个独立的软件进行分析，以使更多人受益。

数据准备

如您所见，我们有一个包含吸光度数据的电子表格，这些数据是使用Calbiotech竞争性ELISA试剂盒获得的。该表中的每个单元格表示与ELISA板上的样品或标准相对应的吸光度测量值。

标准浓度的计算

在计算标准值之前，我们需要计算我们的标准的平均吸光度值。我们可以通过以下步骤来计算标准的平均吸光度值:

1. 创建一个名为"average absorbance"的新列，并使用Excel的平均函数计算标准的平均吸光度值。
2. 将平均吸光度值排列在原始数据表格的下方。

请注意，在计算剩余标准的平均值时，只需点击底部右下角的小方框并拖动以填充剩余的单元格即可。

标准浓度的录入

根据制造商提供的说明书，标准的浓度为0、5、10、25、50和100 ng/mL。将这些标准浓度录入到吸光度值的右侧新列中。

数据图表绘制与趋势线拟合

现在，让我们绘制数据图表并拟合一条曲线，以便我们可以插值出样本的浓度值。

绘制数据图表

选择吸光度值和标准浓度的两列数据，然后进入Excel的"图表"选项，并选择"散点图"。在图表中，纵轴表示浓度值，横轴表示吸光度值。

趋势线的拟合

为了拟合曲线，我们需要选择任意一个数据点，右键点击并选择"添加趋势线"。在弹出的对话框中，我们可以选择不同类型的趋势线。线性和对数趋势线都无法很好地拟合我们的数据。由于我们的数据在x和y变量之间存在反相关关系，因此我们选择使用二次多项式进行拟合。在拟合曲线的选项中，会显示出该曲线的方程和R²值，我们可以根据R²值的高低选择最适合的曲线。根据我们的测试结果，选择三次多项式拟合后的R²值最接近1。

数据计算与验证

现在，我们可以使用拟合的方程来计算样本的浓度。首先，将样本的吸光度值复制并粘贴到标准吸光度值下方。然后，计算这些吸光度值的倒数，方法与计算标准吸光度值的平均值相同。在完成倒数的计算后，使用拖动的方式计算所有样本的浓度值。值得注意的是，在计算样本浓度时，我们只能计算处于标准浓度范围内的样本。对于未在标准浓度范围内的样本，需要进行稀释或浓缩处理。

为了验证我们的计算公式是否正确，我们可以选择一些样本进行检查。根据图表，我们可以核对计算出的浓度值是否与图表中的数据吻合。如果有样本不在标准浓度范围内，我们需要删除其计算的浓度值，因为这些浓度值是无效的。

需要注意的是，这里显示的浓度值是样本添加到ELISA板时的浓度。例如，如果将样本稀释10倍后再添加到板中，则其实际浓度将是所显示浓度的10倍。因此，我们需要将这些浓度值乘以10，以获得样本的原始浓度。

注意事项与总结

进行ELISA数据分析时需要注意以下几点：

1. 数据准备应以准确性和一致性为基础。确保正确记录标准浓度与吸光度值，并将它们放在适当的位置。
2. 数据图表的绘制应清晰明了，确保浓度和吸光度值的正确对应关系。
3. 在重新计算样本浓度时，需注意样本是否在标准浓度范围内，若不在范围内，则需进行稀释或浓缩处理。

通过使用Microsoft Excel进行竞争性ELISA数据分析的示范，我们可以准确计算出样本的浓度，并将其用于进一步的统计分析和研究报告。希望本视频能对你有所帮助。如果喜欢此教程，请点赞并与他人分享。谢谢观看！

Highlights

• 使用Microsoft Excel分析竞争性ELISA数据的方法
• 如何计算标准吸光度的平均值
• 标准浓度的录入与计算
• 数据图表的绘制与趋势线的拟合
• 样本浓度的计算与验证
• 注意事项与总结

FAQ

Q1: 是否可以使用其他软件分析ELISA数据？

A1: 是的，除了Microsoft Excel，还有其他软件也可以用于ELISA数据分析，不同软件可能具有不同的功能和分析方法。

Q2: 为什么要选择二次多项式进行曲线拟合？

A2: 在竞争性ELISA中，吸光度和浓度之间存在反相关关系。二次多项式可以更好地拟合这种关系，使得浓度的插值更准确。

Q3: 如果我的样本浓度超出了标准范围怎么办？

A3: 如果样本浓度超出了标准范围，需要根据具体情况进行稀释或浓缩处理，以确保浓度在标准可测范围内。

Q4: 如何验证计算的样本浓度是否正确？

A4: 可以根据图表数据对照计算得到的样本浓度进行验证，确保计算结果与实际数据相符合。

资源

• ELISA竞争法的工作原理（链接）